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      NEST細胞培養如何選擇合適的呢?

      點擊次數:134 發布時間:2021-06-22
        NEST細胞培養是指在體外模擬體內環境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。
       
        不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,本身就是細胞的大規??寺?。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,而且細胞培養本身就是細胞的克隆。
       
        市場上的NEST細胞培養可不少,如何選擇合適的呢?我們需要重點考慮孔的數量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。
       
        1.孔的數量
       
        大多數用戶在組織培養瓶上開始組織培養。不過,許多應用也需要多孔板。理想的數量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機器人的協助。完全手動地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動移液器或機器人的幫助當然更好。擴展到384孔板,就更加需要機器人,而1536孔板更是絕對需要。當然,高密度多孔板的挑戰還在于分析小型化。
       
        2.孔的形狀
       
        孔的底部可以選擇平的、圓的,或錐形的,這取決于細胞類型和下游應用。特別是需要對培養物進行成像或分光光度測定,通常平底(F-bottom)。對于不存在接觸抑制的細胞,弧形底(C-bottom)也不錯。圓底(U-bottom)適合懸浮培養,因為圓的表面讓細胞難以附著和生長。而錐形底很少用于細胞培養實驗,但在細胞沉淀時可能有用。
       
        3.微孔板的顏色
       
        多孔板的顏色也與應用息息相關。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細胞,可選擇透明的多孔板。不過,對于可見光光譜以外的應用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數的儀器時,底部應該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數的儀器時,應選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便最大限度提高信號的反射率,而大于300 nm的熒光應用通常使用黑色表面,以吸收激發信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串擾。
       
        4.表面處理
       
        選擇哪種細胞表面處理,這要取決于你培養的是懸浮細胞還是貼壁細胞。對于懸浮或球體細胞培養,它經過專門的疏水凝膠處理,可抑制細胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細胞(如HeLa),標準的組織培養表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細胞(如原代細胞),或涉及到嚴格洗滌的應用,建議使用BRAND的cellGrade微孔板。這種獨特的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質的物理變化,因此不需要冷藏。對于那些敏感細胞或血清量減少的細胞,建議使用cellGrade plus表面。
       
        當然不能忽視培養容器的質量。這不僅僅指NEST細胞培養,還包括與細胞接觸的一切,比如吸頭,以避免細胞污染或死亡。